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维生素是人体必需的营养成分,可分为脂溶性维生素和水溶性维生素。主要的水溶性维生素包括维生素B族,维生素C等,主要的脂溶性维生素包括维生素A,D,E,K等。此次采用反相色谱柱对7种脂溶性维生素成分进行同时分析,并采用DAD进行检测。通过采用DAD,可在最佳波长处进行高灵敏度同时分析。进一步来说,由于可根据吸收光谱识别检测到的色谱峰,因此对于诸如食品等掺杂成分较多的试样特别有效。
以定性为目的时,请使用此处介绍的同时分析。由于某些维生素不稳定,因此实施定量分析时,建议按照各种维生素各自的试验方法进行前处理,并在规定的测定条件下进行分析。

脂溶性维生素的同时分析

标准试样

度和化学结构式

成分名 浓度
维生素A(视黄醇,retinol) 1 mg/L
维生素A醋酸酯(视黄醇醋酸酯,retinol acetate) 10 mg/L
维生素D2(麦角钙化醇,ergocalciferol) 10 mg/L
维生素D3(胆钙化醇,cholecalciferol) 10 mg/L
维生素E(dl-α-生育酚,dl-α-Tocopherol) 100 mg/L
维生素E醋酸酯(dl-α-生育酚醋酸酯,dl-α-tocopherol acetate) 100 mg/L
维生素K1(叶绿醌,phylloquinone) 10 mg/L
*
用乙醇稀释标准原液
用甲醇稀释标准原液而得到标准溶液

色谱条件

色谱柱 HITACHI LaChrom C18(5 µm) (4.6 mmI.D. x 250 mm)
流动相 CH3CN/CH3OH = 60/40 (v/v)
流速 1.0 mL/min
柱温 40°C
检测波长 DAD 265, 280, 325 nm
进样量 10 µL

仪器配置

5110 泵
5210 自动进样器
5310 柱温箱
5430 二极管阵列检测器
Empower2 色谱工作站

标准品测定结果


等高线和提取色谱图


脂溶性维生素的光谱

线性相关

关于标准曲线的范围,VA为 0.01 - 10 mg/L,VA醋酸酯, VD2 , VD3 , VK1为 0.1 - 100 mg/L; 1 - 1,000 mg/L) 醋酸酯为 r2= 0.9999以上, 都获得良好的线性相关。

实际样品测定(1)

眼药水


[眼药水的前处理方法]
用甲醇将样品稀释10倍,用0.2 µm过滤器过滤


[检测到的各个色谱峰和标准品的光谱]

实际样品测定(2)

补品


[补品的前处理方法]
称取试样 0.1 g,用甲醇定容至 10 mL,用 0.2 µm 过滤器过滤


[检测到的各个色谱峰和标准品的光谱]

维生素E:

天然:d- α -生育酚
从植物油中萃取,不添加任何物质使之保持稳定
天然型:d- α -生育酚醋酸酯
从植物油中萃取,使之和醋酸结合而保持稳定
合成:dl- α -生育酚醋酸酯
通过化学合成制造
生理活性由低到高的顺序为:合成 < 天然型 < 天然

结果:

从眼药水中检测到维生素A和维生素E醋酸酯,从补品中检测到维生素E。各个色谱峰和标准品的光谱比较,高度一致。
即使是诸如眼药水所含的VA等浓度较低的成分,也可充分加以定性。
作为医药品的维生素E包括天然/天然型/合成等3种亚型,可根据产品区分使用。

注意:
本资料所示数据仅为测定例用数据而非可保证仪器性能的数据。
本仪器只是研究用仪器,而不是诊断,治疗或预防人或动物疾病的医疗仪器。

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