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6. 分离模式和色谱柱(3)

洗脱液选择

洗脱液是分离的另一个重要因素。例如,使用ODS色谱柱测定分析条件,实验按如下操作:
首先,使用100%的有机溶剂,这些成分就可较早洗提出来。甲醇和乙腈通常用作该种有机溶剂。
图1 为甲醇作为洗脱提液获得的色谱图。

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虽然样品由五种成分组成,但只得到四个峰型,这表明有两种成分未发生分离。因此甲醇/水(=90/10)混合洗脱液洗脱了。
图2 为获得的色谱图,第二个峰型说明几乎未分离。

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接下来,使用另外一种甲醇/水(= 80/20)混合洗脱液以更高的水比率洗脱。随着整个分析时间的增加,五种成分成功发生了分离,如图3所示。

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由此可以看出,色谱法分离很大程度上取决于所选取的洗脱液。因此选择的洗脱液应适合样品中目标成分和其它成分。

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