HPLC Chromaster（クロムマスター）
-第十六改正日本薬局方収載医薬品の測定例（アセチルシステイン）-
2011年4月に施行された第十六改正日本薬局方では、医薬品各条に100を超える医薬品の試験法が追加されました。
ここでは、新規収載品目の1つであるアセチルシステインの純度試験のうち、類縁物質の測定をHPLC-UVでおこないました。まず規定された試験条件に基づきシステムの適合性を確認し、その後類縁物質の確認をおこないました。類縁物質の確認には、微小なピークを正確に把握する必要があるため、検出器の性能が重要なファクターとなります。日立高速液体クロマトグラ「Chromaster」5410UV検出器は低ノイズ・低ドリフトを実現し、高感度測定が可能です。
なお今回は医薬品のモデルサンプルとして、一般試薬のアセチルシステインを用いました。
システム適合性の確認
測定条件：
| カラム | HITACHI LaChrom C18 (5µm)(4.6mmI.D. x 250mm) |
|---|---|
| 溶離液 | 薄めたリン酸（1→2500）/アセトニトリル＝19/1（v/v） |
| 流量 | 1.1 mL/min |
| カラム温度 | 40°C |
| 検出波長 | UV 210 nm |
| 注入量 | 10 µL |
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システム適合性
第十六改正日本薬局方では、純度試験（6）類縁物質測定のシステム適合性として、「検出の確認」「システムの性能」「システムの再現性」が定められています。以下に規定値と今回の測定結果をまとめました。
いずれの項目も、この要求を満たす結果が得られました。
| 項目 | システム適合性要求値 | 測定結果 | |
|---|---|---|---|
| 検出の確認 | （2 mg/L ピーク面積値/10 mg/L ピーク面積値）× 100（％） | 15 - 25 | 19.6 |
| システムの性能 | 理論段数（10 mg/L） | 15000以上 | 17554 |
| シンメトリー係数（10 mg/L） | 1.5以下 | 1.29 | |
| システムの再現性 | ピーク面積の相対標準偏差（n＝6） （10 mg/L） |
2.0%以下 | 0.58% |
類縁物質の確認
測定条件：
| カラム | HITACHI LaChrom C18 (5 µm) (4.6 mm I.D. x 250 mm) |
|---|---|
| 溶離液 | 薄めたリン酸（1→2500）/アセトニトリル＝19/1（v/v） |
| 流量 | 1.1 mL/min |
| カラム温度 | 40°C |
| 検出波長 | UV 220 nm |
| 注入量 | 10 µL |
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アセチルシステインの類縁物質として複数のピークが確認されました。（1）（2）の微小なピークは、それぞれアセチルシステイン2,000 mg/Lの面積値の約0.03％に相当します。 本測定例ではそれぞれS/N＝28、S/N＝13であり、十分信頼できるピーク高さと面積値を確保できました。
類縁物質の確認
第十六改正日本薬局方では、純度試験（6）類縁物質の確認として、アセチルシステイン以外のピーク面積について2種類の数値が定められています。以下に規定値と今回の測定結果をまとめました。いずれの項目も、この要求を満たす結果が得られました。
| 類縁物質の確認規定値 | 測定結果 | |
|---|---|---|
| アセチルシステイン以外の ピーク面積 |
それぞれ0.3％以下 | それぞれ0.16％以下 |
| 合計0.6％以下 | 合計0.31％ |
(2,000 mg/L, 10 µL 注入)
注意：本掲載データは測定例を示すもので、数値を保証するものではありません。
本製品は研究用です。診断用ではありません。
